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關(guān)于ATCC細(xì)胞系與細(xì)胞株的概念區(qū)分

原載自:www.bchzp.com[行情動(dòng)態(tài)]  2018-11-13  瀏覽次數(shù):1882

  關(guān)于ATCC細(xì)胞系與細(xì)胞株的概念區(qū)分,很多客戶不是很了解,今天就簡(jiǎn)單介紹一下。
  細(xì)胞株的概念
  通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株,也就是說,細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。
  ATCC細(xì)胞系的概念
  細(xì)胞系是原代細(xì)胞經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系。泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系。由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限,可稱為有限細(xì)胞系,如可以連續(xù)培養(yǎng),則稱為連續(xù)細(xì)胞系,培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長(zhǎng)穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
  ATCC細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
  細(xì)胞培養(yǎng)步驟一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
  1) 準(zhǔn)備培養(yǎng)基;北美胎牛血清,10%;雙抗1%。
  2) 培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
  3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
  二. CHL-1細(xì)胞ATCC菌種處理:
  1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
  2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
  ATCC細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。(由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系(FiniteCellLine)、無限細(xì)胞系(InfiniteCellLine)),因此,細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞(特定環(huán)境下口語和書面語都使用),廣義是指可傳代的細(xì)胞。

 

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