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新聞動態(tài) / news
細(xì)胞株的增殖檢測技術(shù)探討
原載自：www.bchzp.com[行情動態(tài)] 2021-10-15 瀏覽次數(shù)：898
細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物，也就是說，細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。如果不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限，稱為有限細(xì)胞株；如果可連續(xù)傳代，稱為連續(xù)細(xì)胞株。對于人類腫瘤細(xì)胞，在體外培養(yǎng)半年以上，生長穩(wěn)定的并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
細(xì)胞株應(yīng)用MTT比色法，可檢測其存活和生長狀況。其檢測原理為活細(xì)胞內(nèi)線粒體中的琥珀酸脫氫酶能催化外源性無色的MTT形成藍(lán)色的結(jié)晶Formazan，并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的Formazan，用酶聯(lián)免疫檢測儀在一定波長處測定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。
該方法現(xiàn)已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗、以及腫瘤放射敏感性測定等。
相關(guān)項目如下：
1.細(xì)胞接種：用戶收到細(xì)胞后，用細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)細(xì)胞，得出細(xì)胞懸液濃度。計算出應(yīng)稀釋的倍數(shù)，按MTT試劑盒要求在96孔板內(nèi)接種相應(yīng)濃度的細(xì)胞懸液；
2.細(xì)胞培養(yǎng)：在無菌恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)接種好的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，并實時觀察細(xì)胞狀態(tài)；
3.藥物處理并呈色：按不同濃度梯度加入藥物作用細(xì)胞；
4.溶解、比色：加入MTT檢測試劑，按操作要求孵育相應(yīng)時間，在酶標(biāo)儀內(nèi)檢測對照組和實驗組的吸光值。并處理數(shù)據(jù)得出比色結(jié)果。
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